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1.
Braz. arch. biol. technol ; 44(2): 166-171, jun. 2001. ilus
Article in English | LILACS | ID: lil-315360

ABSTRACT

O objetivo deste trabalho foi avaliar a endocitose de duas proteínas de Bence Jones por células renais, com a finalidade de elucidar a interferência de características físico-químicas na nefrotoxicidade. As proteínas de Bence Jones (denominadas AK e GL) forma purificadas e isoladas da urina de dois pacientes com mieloma múltiplo. Isótopos de ambas as proteínas foram caracterizados como sendo cadeias leves lambda monoclonais humanas. AK, apresentou principalmente pI>7,0, alto conteúdo de galactose e baixo teor de moléculas de ácido siálico. Por outro lado, GL apresentou uma única banda com pI 4,3, maior teor de ácido siálico e baixo teor de galactose, em comparaçäo co AK. Células renais de hamster, BHK(Baby Hamster Kidney) foram mantidas em cultura à temperatura de 37§C, utilizando meio de cultura DMEM suplementado com 10 por cento de sooro fetal bovino, em pH 7,4. Quando confluentes, as células BHK foram incubadas com as duas proteínas dissolvidas em meio isento de soro, durante 1, 5, 15, 30, 60 minutos e 24 horas. Foi omitida a incubaçäo com proteínas de Bence Jones em células usadas como controle. Com o término da incubaçäo, as células foram lavadas, tripsinizadas, centrifugadas e fixadas em soluçäo de paraformaldeído 4, 0 por cento e glutaraldeído 0,5 por cento em tampäp fosfato 0,1M pH 7,4. A seguir, os pellets obtidos foram processados para microscopia e incluídos em LRWhite. Cortes semi-finos foram colhidos e submetidos a reaçöes imunocitoqumícas, utilizando proteína acoplada a ouro coloidal e intensificaçäo pela prata. A detecçäo da amrcaçäo foi avaliada em microscopia de luz. Os resultados mostraram q1ue a proteóna GL tendeu a ser direcionada para localizaçäo pewri-nuclear. Por outro lado, AK demonstrou um comportamento diferente. Os dados indicaram que houve uma contribuiçäo direta das características físico-químicas das proteínas no direcionamento intracelular


Subject(s)
Cells , Endocytosis , Kidney , Nephrology , Bence Jones Protein/physiology , Bence Jones Protein/chemistry , Toxicology , Cricetinae , Galactose , Multiple Myeloma , N-Acetylneuraminic Acid
2.
Braz. arch. biol. technol ; 43(3): 253-7, set. 2000. tab, graf
Article in English | LILACS | ID: lil-285082

ABSTRACT

Na raiva a mensuraçäo da resposta imune específica é realizada através da prova de soro neutralizaçäo em camundongos. É inquestionável que os anticorpos neutralizantes säo os responsáveis pela proteçäo dos indivíduos contra infecçäo rábica. Por outro lado, de acordo com a Organizaçäo Mundial de Saúde, somente os portadores de anticorpos neutralizantes com título igual ou superior a 0,5 UI estäo satisfatoriamente protegidos. Este estudo mostra a monitorizaçäo de anticorpos anti-rábicos de indivíduos expostos ao risco de infecçäo rábica, realizada pelo Departamento Médico do Instituto de Tecnologia do Paraná. 57 indivíduos com idade entre 20 e 40 anos, foram vacinados com vacina tipo Fuenzalida-Palacios com título mínimo de 1,3 UI. O esquema vacinal consou na aplicaçäo de três doses da vacina com intervalos de dois dias e um reforço vacinal 28 dias após a última dose. A monitorizaçäo dos títulos de anticorpos foi realizada através do teste do soro neutralizaçäo durante um período de 18 meses. Esta mostrou a necessidade da aplicaçäo de um reforço vacinal em parte do grupo. Parte destes indivíduos foram revacinados com vacina tipo Fuenzalida-Palacios com título mínimo de 1,3 UI e parte com vacina de cultivo celular com título mínimo de 2,5 UI. Todos os indivíduos responderam com título maior que 0,5 UI, mantendo estes níveis até o final do período de observaçäo, demonstrando a pronta resposta anamnéstica de ambos os imunógenos


Subject(s)
Humans , Male , Female , Adolescent , Adult , Middle Aged , Effluent Neutralization , Public Health , Rabies Vaccines , Mice , Rabies , Vaccines, Synthetic
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